کتاب روش های آزمایشگاهی پیشرفته در علوم گیاهی و کشاورزی

ستایش خداوند بلند مرتبه را سزاست که توفیق نگارش مجموعه حاضر را برای مؤلفان فراهم آورد. مفید فایده خواهد بود تا خوانندگان گرامی مطالبی را در خصوص روند تألیف کتاب حاضر در نظر داشته باشند پیرو ترجمه کتاب روشهای آزمایشگاهی تجزیه ای در علوم باغبانی مستوفی و نجفی ۱۳۸۴ ترجمه کتاب ساینی و همکاران توسط مؤلفان کتاب حاضر در سال ۱۳۸۴ توسط انتشارات دانشگاه تهران با توجه به اینکه در آن زمان کتاب مذکور تنها مرجع اصلی در زمینه روشهای آزمایشگاهی بود بر آن شدیم همگام با پیشرفتهای علمی مجموعه ای به مراتب کامل تر تهیه و تدوین کرده و پیشکش جامعه دانشگاهی و فرهیخته کشور کنیم

با وجود دقت تمام در نگارش متن حاضر و انتخاب واژه های مناسب نمیتوان ادعا داشت که کتاب پیش رو عاری از ایراد باشد. از این رو سپاسگزار خواهیم بود که همکاران گرامی پژوهشگران دانشجویان و کلیه خوانندگان محترم مؤلفان را از راهنماییهای ارزنده خود در جهت غنای علمی این مجموعه بهره مند سازند.

در نهایت از همکاری های ارزنده معاونت محترم آموزشی و پژوهشی دانشگاه تهران و پردیس کشاورزی و منابع طبیعی دانشگاه تهران به سبب فراهم آوردن امکانات انتشار این کتاب پیشاپیش تشکر و قدردانی میکنیم

با آرزوی آنکه تلاش حاضر توانسته باشد در ارضای حس کنجکاوی و رفع نیازهای پژوهشی علاقه مندان پژوهشگران و دانشجویان رشته ها و مقاطع مختلف کشاورزی و علوم زیستی گامی هرچند اندک بردارد.

تهیه عصاره آنزیمی ۲ گرم بافت گیاهی با هاون و دسته هاون سرد با ۲ میلی لیتر بافر فسفات پتاسیم ۵۰ میلی مولار (pH) حاوی ۱EDTA میلی مولار و آسکوربیک اسید ۱ میلی مولار ساییده شود. پس از همگن شدن محلول در ۴ به مدت ۱۰ دقیقه در ۱۸۰۰۰ سانتریفیوژ شده و محلول روشناور از ستونهای با قدرت نمک زدایی بالای ۰/۱۰ برای حذف اکسیدور دو کتانتهای با وزن مولکولی پایین عبور داده شود. بخش حاوی پروتئین ها به عنوان عصاره خام به کار میرود.

روش کار

فعالیت آنزیم آسکوربات پراکسیداز در MES-KOH MES-KOH ۵۰ میلی مولار (۶) pH) یا بافر فسفات پتاسیم ۵۰ میلی مولار (۷) pH) حاوی آسکوربیک اسید ۰/۵ میلی مولار و هیدروژن پراکسید ۰/۱ میلی مولار و عصاره آنزیمی در یک حجم نهایی ۱ میلی لیتر تعیین میشود. اکسیداسیون وابسته به هیدروژن پراکسید آسکوربیک اسید با کنترل کاهش در جذب در طول موج ۲۹۰ نانومتر ثبت میشود.

محاسبات

اکسیداسیون آسکوربیک اسید وابسته به هیدروژن پراکسید با کنترل کاهش در جذب در طول موج ۲۹۰ نانومتر و با فرض ضریب خاموشی ۲/۸m Cm برای آسکوربات دنبال میشود. مقدار آنزیم آسکوربیک پراکسیداز که بتواند ۱ میکرومول آسکوربیک اسید را در دمای ۲۵ به )Nakana & Asada, 1981( مدت ۱ دقیقه اکسید کند به صورت ۱ واحد آنزیمی تعریف میشود